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酵母展示平台

母细胞表面展示技术在抗体工程研究中具有许多独特的优势:1) 真核表达,使得其展示的抗体折叠更完全;2)可有效的与流式细胞术结合,提高筛选通量,并可将定量鉴定引入了筛选过程。

      康宁杰瑞与丁孚靶点合作建立了全人非免疫单链抗体酵母展示文库,可以快速针对不同靶标筛选高亲和力全人抗体序列。

      利用从未免疫的健康人群的外周淋巴细胞中获取的可变区cDNA片段,通过基因工程技术构建于酵母表面展示重组载体上,构建完成了非未免scFv酵母展示文库。该文库所包含的人源scFv的容量超过10^9,为筛选获得nM级别高亲和力的单链抗体提供了保障。同时,该文库还被证明可以通过容错PCR等随机诱变技术进行10^10倍的无偏向扩增,能有效满足的抗体从nM级别到pM级别的亲和力成熟需求。

      配合高通量筛选的流式细胞分选技术,我们可以在8-10周内得到初筛序列,4-6周内得到亲和力成熟至pM级别的候选全人抗体序列。同时,利用特有的筛选策略,除了阻断型抗体之外,还能快速获得激活型抗体序列。目前,我们已经获得多个功能确定,准备进入工艺优化的全新候选抗体序列,其中还包括多个激活型抗体。

      同时,利用酵母展示平台技术,我们还能根据已有序列,快速构建纳米抗体的亲和力成熟文库、人源化文库等。其库容均能达到10^8。